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血細(xì)胞分離原理
在體外進(jìn)行細(xì)胞免疫檢測時(shí),首先必須進(jìn)行淋巴細(xì)胞的分離。分離淋巴細(xì)胞的方法很多,但不管采用哪種方法,均要求分離的淋巴細(xì)胞純度高、產(chǎn)量多,而且不喪失活性,同時(shí)也要求分離技術(shù)簡單、操作方便。外周血液中紅細(xì)胞和白細(xì)胞的比例在幾百甚至上千比一,兩類細(xì)胞的大小和密度不同,其沉降速度也就不同。紅細(xì)胞的自然沉降率較快,加入高分子量的聚合物,如明膠、右旋糖酐等還可以加速其凝聚。利用自然沉降法、密度梯度離心法或二者結(jié)合,可以將淋巴細(xì)胞從血液中分離出來。這種分離出的淋巴細(xì)胞一般包括單核細(xì)胞。除去單...
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ELI-SPOT 及其應(yīng)用
一、原理ELI-SPOT,即斑點(diǎn)ELISA,是利用酶標(biāo)板作反應(yīng)容器進(jìn)行的酶聯(lián)免疫反應(yīng)。其基本原理與ELISA相同。首先用捕獲抗體包被反應(yīng)板,封閉后,依次加入待檢標(biāo)本、生物素化檢測抗體、鏈霉菌抗生物素蛋白-堿性磷酸酶及底物,陽性結(jié)果出現(xiàn)斑點(diǎn)顯色,利用倒置顯微鏡進(jìn)行斑點(diǎn)計(jì)數(shù)。其優(yōu)勢在于可在與體內(nèi)(活體條件)極接近的條件下,在體外對細(xì)胞分泌成分(如細(xì)胞因子、Fas等)進(jìn)行追蹤研究。幾點(diǎn)說明:l反應(yīng)板:ELI-SPOT所用的反應(yīng)板可以是PVDF膜包被好的,也可以是普通酶標(biāo)板。如用普通...
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細(xì)胞內(nèi)鈣離子PH值和其它離子的動態(tài)分析
細(xì)胞內(nèi)鈣離子PH值和其它離子的動態(tài)分析通過Indo-1、Fluo-2、Fluo-3、Calciumgreen、SNARF等多種熒光探針,可對細(xì)胞內(nèi)鈣離子、鈉離子及PH值等作熒光標(biāo)記并對它們進(jìn)行比率值和濃度梯度變化測定。由于細(xì)胞內(nèi)鈣離子為傳遞信息的第二信使,對細(xì)胞生長分化起著重要作用,通過單標(biāo)記或雙標(biāo)記對細(xì)胞內(nèi)鈣離子和其它離子的熒光強(qiáng)度和分布測定,測定樣品達(dá)到毫秒級的快速變化。借助光學(xué)切片功能可以測量樣品深層的熒光分布以及細(xì)胞光學(xué)切片的生物化學(xué)特性的變化。通過不同時(shí)間段的檢測可...
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重組人的載脂蛋白E2 ApoE2
Synonyms:ApolipoproteinE2Description:ApoEbelongstoagroupofproteinsthatbindreversiblywithlipoproteinandplayanimportantroleinlipidmetabolism.Inadditiontofacilitatingsolublizationoflipids,theseproteinshelptomaintainthestructuralintegrityoflipo...
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脂聯(lián)素和肥胖的關(guān)系
脂聯(lián)素的概念A(yù)diponectin(脂聯(lián)素)是脂肪細(xì)胞分泌的一種內(nèi)源性生物活性多肽或蛋白質(zhì).人體內(nèi)的Adiponectin(脂聯(lián)素)由244個(gè)氨基酸組成,分子量為30KD.Adiponectin(脂聯(lián)素作為一種胰島素增敏激素(AnInsulin-sensitizingHormone),可以增加促進(jìn)骨骼肌細(xì)胞的脂肪酸氧化和糖吸收,明顯加強(qiáng)胰島素的糖元異生作用,抑制肝臟的糖生成,是機(jī)體的脂質(zhì)代謝和血糖穩(wěn)態(tài)的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中的重要調(diào)節(jié)因子.日本學(xué)者近來證明Adiponectin(脂聯(lián)素)...
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人腫瘤壞死因子(TNFα elisa kit)酶聯(lián)免疫法定量檢測試劑盒
人腫瘤壞死因子酶聯(lián)免疫法定量檢測試劑盒HumanTNF-aELISAKit產(chǎn)品描述:腫瘤壞死因子(TNF)是一種具有廣泛生物學(xué)活性的細(xì)胞因子,主要由激活的單核-巨噬細(xì)胞所分泌,參與機(jī)體的免疫調(diào)節(jié)與炎癥反應(yīng),也是某些感染性疾病和肝臟損傷的致病因素。正常人體液中的TNF水平一般在100pg/ml以下,當(dāng)患有某些疾病時(shí),TNF水平可有不同程度增高。因此,檢測患者體液中的TNF水平,具有一定的臨床意義。本試劑盒采用雙抗夾心酶聯(lián)免疫檢測法測定人血漿或血清中的TNF,包被抗體及檢測抗體采...
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血漿脂聯(lián)素和腫瘤壞死因子-α在2 型糖尿病中
血漿脂聯(lián)素和腫瘤壞死因子-α在2型糖尿病中的作用及相關(guān)性柳江燕,陳雪紅,胡金貴,王正江,馬冬梅,魯秀娟柳江燕730030蘭州大學(xué)第二醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科;陳雪紅730030蘭州大學(xué)第二醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科;胡金貴730030蘭州大學(xué)第二醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科;王正江730030蘭州大學(xué)第二醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科;馬冬梅730030蘭州大學(xué)第二醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科;魯秀娟730030蘭州大學(xué)第二醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科通訊作者:柳江燕730030蘭州大學(xué)第二醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科【摘要】目的探討血漿脂聯(lián)素(adiponectin)和腫瘤壞死因...
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甲基強(qiáng)的松龍對嗅鞘細(xì)胞移植治療受損視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的
甲基強(qiáng)的松龍對嗅鞘細(xì)胞移植治療受損視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的早期保護(hù)效應(yīng)裴群羽,許媛媛,王珂,楊立元,楊磊,雷季良北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部解剖學(xué)教研室,北京市100083裴群羽★,女,1980年生,黑龍江省哈爾濱市人,漢族,北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部在讀碩士,主要從事中樞神經(jīng)再生方面研究。Hxz800829通訊作者:雷季良,副教授,北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部解剖學(xué)教研室,北京市100083leijiliang中圖分類號:R617文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A文章編號:1673-8225(2007)29-05701-04收稿日期:20...
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表皮生長因子EGF與胚胎發(fā)育和著床
國外醫(yī)學(xué)計(jì)劃生育分冊2000年2月第19卷第1期重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院婦產(chǎn)科(400046)審校摘要胚胎著床過程的調(diào)節(jié)十分復(fù)雜,近年來細(xì)胞生長因子參與胚胎發(fā)育和著床的功能研究十分熱門,在細(xì)胞生長因子發(fā)揮作用的網(wǎng)絡(luò)中,表皮生長因子起著舉足輕重的作用,是著床過程順利完成*的因子之一。本文就表皮生長因子改善胚胎發(fā)育、啟動胚胎著床、調(diào)節(jié)植入過程等內(nèi)容進(jìn)行簡要綜述。關(guān)鍵詞:表皮生長因子胚胎發(fā)育著床自1962年Cohen從雄鼠頜下腺分離提純出表皮生長因子(epidermalgrowth...
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ELISA的操作要點(diǎn)
的試劑,良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件。ELISA的操作因固相載體的形成不同而有所差異,國內(nèi)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)一般均用板式點(diǎn)。本文將敘述板式ELISA各個(gè)操作步驟的注意要點(diǎn),珠式、管式及磁性球ELSIA,國外試劑均與特殊儀器配合應(yīng)用,兩者均有詳細(xì)的使用說明,嚴(yán)格遵照規(guī)定操作,必能得出準(zhǔn)確的結(jié)果。4.1標(biāo)本的采取和保存可用作ELISA測定的標(biāo)本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標(biāo)本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)...
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急性腦梗死患者細(xì)胞因子測定及其臨床意義
急性腦梗死患者細(xì)胞因子測定及其臨床意義黃勤華2006-10-1922:55:12《吉林醫(yī)藥學(xué)院學(xué)報(bào)》2006年9月第27卷第3期關(guān)鍵詞:腦梗死;血漿組織型纖溶酶原激活劑;血管性血友病因子;纖維連接蛋白;內(nèi)皮素;6酮前列腺素摘要:目的探討急性腦梗死患者血漿中血栓與止血檢驗(yàn)相關(guān)標(biāo)記物含量變化及其與臨床之間的關(guān)系。方法測定急性腦梗死患者53例血漿組織型纖溶酶原激活劑(tPA)、血管性血友病因子(vWF)、纖維連接蛋白(Fn)、內(nèi)皮素(ET)、6酮前列腺素(6KPGF1...
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關(guān)于diaclone的盒子的樣本收集要點(diǎn)
樣品收集,處理和保存1.血清——操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000xg離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2.血漿——EDTA,檸檬酸鹽和肝素血漿可用于檢測。1000Xg離心30分鐘去除顆粒。3.保存——如果樣品不直接使用,將其分為小部分(250-500ul)-70℃下保存,避免反復(fù)冷凍。如果可能,不要使用溶血和高脂血。如果血清中有大量的顆粒,檢測前先離心或過濾。注意:不要在37℃或56℃加熱解凍。在室溫下解凍并確保樣品均勻地充...
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